Bikaranîn û tedbîrên lûleya santrîfujê ya ultrafiltration
1) Tîpek ultrafiltration guncan hilbijêrin.Bala xwe bidinê ku membranên UF di asta tolerasyona xwe de li hember cûrbecûr kîmyewî cûda dibin.Bi gelemperî, lûleyên ultrafiltration bi qutkirina giraniya molekulî ya 10 kDa dikare bi qutkirina giraniya molekulî ya ku divê ji 1/3 ya giraniya molekulê ya proteîna balkêş mezintir nebe, wek 35 kDa, were hilbijartin.Ger giraniya molekulê ya proteîna balkêş li dora 10 kd be, lûleyek ultrafiltrasyonê ya bi giraniya molekulê 3 KD dikare were bikar anîn.
(2) Ultrafiltration, ku ji nû ve hatî kirîn, zuwa ye, bi ava ultrapaqij berî karanîna tê zêdekirin û av bi tevahî di nav membran, serşokê an sarincokê de berî çend hûrdeman sar bûye derbas dibe.Dûv re av tê rijandin, ango şilava proteîn, û çiqas lê zêde dibe, kîjan ji xeta spî ya serê lûleyê ne zêdetir be.Operasyon sivik e, û berî ku çareseriya proteîn lê zêde bike pêdivî ye ku lûleya ultrafiltration li ser berfê were sar kirin.
3) Hem girse û hem jî navenda giraniyê diviyabû ku bigihêje hevsengiyê.Bala xwe bidin leza zivirandinê û lezbûn ne pir zû ne, wekî din rasterast zirarê dide membrana ultrafiltration.Ultrafiltrasyona centrifûgal dest pê kir (santrîfuj berî 4 pileyî hate sar kirin).Piştî ku RPM ya santrîfujên cihêreng veguherî g, ew cûda bû.Lezkirina santrîfujê bi kêmî ve hate sererast kirin, zexta li ser membranê kêm kir.Bala xwe bidinê, pê ewle bin ku hûn dev ji santrîfujê berdin piştî ku santrîfuj gihîştiye leza xwe ya cihê, an jî heke pirsgirêkek we hebe, hûn nikaribin wê ji bo cara yekem bi rê ve bibin.Arasteya parzûnê ya ber bi tîrêjê ve li gorî rêwerzan hate guheztin (doza santrîfujê ya goşeyî ji membranê ber bi eksê perpendîkular e).Di karanîna pratîkî de, leza zivirîna giştî ji ya di rêwerzan de kêmtir e, da ku jiyana lûleya santrîfujê were dirêj kirin.
3) Hem girse û hem jî navenda giraniyê diviyabû ku bigihêje hevsengiyê.Bala xwe bidin leza zivirandinê û lezbûn ne pir zû ne, wekî din rasterast zirarê dide membrana ultrafiltration.Ultrafiltrasyona centrifûgal dest pê kir (santrîfuj berî 4 pileyî hate sar kirin).Piştî ku RPM ya santrîfujên cihêreng veguherî g, ew cûda bû.Lezkirina santrîfujê bi kêmî ve hate sererast kirin, zexta li ser membranê kêm kir.Bala xwe bidinê, pê ewle bin ku hûn dev ji santrîfujê berdin piştî ku santrîfuj gihîştiye leza xwe ya cihê, an jî heke pirsgirêkek we hebe, hûn nikaribin ji bo cara yekem wê bi rê ve bibin.Arasteya parzûnê ya ber bi tîrêjê ve li gorî rêwerzan hate guheztin (doza santrîfujê ya goşeyî ji membrane ber bi eksê perpendîkular e).Di karanîna pratîkî de, leza zivirîna giştî ji ya di rêwerzan de kêmtir e, da ku jiyana lûleya santrîfujê were dirêj kirin.
(4) Dema ku li 1 ml ya mayî tê berhev kirin, 50 ul çareseriya tamponê bistînin, 10 ul herikandinê lê zêde bikin û bibînin ka rengek şîn heye, wekî dadbarek ka lûleya ultrafiltration proteîn wenda ye.Ger boriyek diherike, ji nû ve qatê jorîn birijînin û biherikînin nav boriyek nû da ku ultrafiltration dest pê bike.Ji bo ku bi rastî diyar bikin ka lûle ji dest çûne, 10 hûrdem bi 5 mgml BSA re berî herikînê santrîfuj bikin, li ser rûnê proteîn, an ceribandina xav Bradford bixebitin, û bi lê zêdekirina çareseriya proteîna konsantrekirî ya mayî (ya ku li ser qeşayê tevdigere û pêşî li germbûna proteînan digire) bidomînin. hemû konsantre hatiye zêdekirin.Ger barîna proteînan çêbibe, di dema santrîfujasyonê de baldar bin, ku dibe sedema girtina lûlê.Ger barîn çêbibe, diyar bikin ka sedema taybetî ya baranê zêdebûna proteînek zêde ye an tamponek neguncav e;Ya yekem dikare bi ultrafiltration çend lûleyên ultrafiltration bi hevdemî ve were çareser kirin, hûrgelê kêm bike, û ya paşîn bi veguheztina çareseriyên tampon ên cihêreng heya ku barîna proteînê çênebe were çareser kirin.
(4) Dema ku li 1 ml ya mayî tê berhev kirin, 50 ul çareseriya tamponê bistînin, 10 ul herikandinê lê zêde bikin û bibînin ka rengek şîn heye, wekî dadbarek ka lûleya ultrafiltration proteîn wenda ye.Ger boriyek diherike, ji nû ve qatê jorîn birijînin û biherikînin nav boriyek nû da ku ultrafiltration dest pê bike.Ji bo ku bi rastî diyar bikin ka lûle ji dest çûne, 10 hûrdem bi 5 mgml BSA re berî herikînê santrîfuj bikin, li ser rûnê proteîn, an ceribandina xav Bradford bixebitin, û bi lê zêdekirina çareseriya proteîna konsantrekirî ya mayî (ya ku li ser qeşayê tevdigere û pêşî li germbûna proteînan digire) bidomînin. hemû konsantre hatiye zêdekirin.Ger barîna proteînan çêbibe, di dema santrîfujasyonê de baldar bin, ku dibe sedema girtina lûlê.Ger barîn çêbibe, diyar bikin ka sedema taybetî ya baranê zêdebûna proteînek zêde ye an tamponek neguncav e;Ya yekem dikare bi ultrafiltration çend lûleyên ultrafiltration bi hevdemî ve were çareser kirin, hûrgelê kêm bike, û ya paşîn bi veguheztina çareseriyên tampon ên cihêreng heya ku barîna proteînê çênebe were çareser kirin.
(5) Çend gavên pêşîn têne bikar anîn da ku proteîn biqewirînin, û ger tê guheztin tampon, bi nermî tamponek nû (ultrafiltration bi navgîniya membranek ultrafiltration 0.22um) li dora 1 ml proteîna tevahî zêde bikin, û ji nû ve li dora 1 ml ji bo sê. carên li pey hev, digel qebareya dawîn a konsantrekirî ya paşîn li gorî mêjera proteîna xwestî, bi gelemperî ne ji 500 ultir, di heman demê de di nav 200 ul de jî.Di sê caran de 1000 × an jî zêdetir bi dest bixin, di bingeh de bi qasî guheztina tamponê, ku her carê bi kêmî ve 10 × an zêde dewlemendkirina qebareyê tê hesibandin.
(5) Çend gavên pêşîn têne bikar anîn da ku proteîn biqewirînin, û ger tê guheztin tampon, bi nermî tamponek nû (ultrafiltration bi navgîniya membranek ultrafiltration 0.22um) li dora 1 ml proteîna tevahî zêde bikin, û ji nû ve li dora 1 ml ji bo sê. carên li pey hev, digel qebareya dawîn a konsantrekirî ya paşîn li gorî mêjera proteîna xwestî, bi gelemperî ne ji 500 ultir, di heman demê de di nav 200 ul de jî.Di sê caran de 1000 × an jî zêdetir bi dest bixin, di bingeh de bi qasî guheztina tamponê, ku her carê bi kêmî ve 10 × an zêde dewlemendkirina qebareyê tê hesibandin.
Dema şandinê: Nov-09-2022