Gelek enzîm bi gelemperî di ceribandinên PCR de têne bikar anîn

Reaksiyona zincîra polymerase, bi kurtî wekîPCRbi Îngilîzî, teknîkek biyolojiya molekular e ku ji bo zêdekirina perçeyên DNA yên taybetî tê bikar anîn.Ew dikare wekî dubarekirina DNA ya taybetî ya li derveyî laş were hesibandin, ku dikare hejmareke pir piçûk a DNA-yê pir zêde bike.Di tevahiyaPCRpêvajoya reaksiyonê, yek çînek maddeyan rolek girîng dilîze - enzîm.

1. Taq DNA

Di ceribandinên di rojên destpêkê yênPCR, zanyaran Escherichia coli DNA polymerase I bikar anîn, Lê di vê enzîmê de pirsgirêkek heye: her gava ku çerxek çêdibe pêdivî ye ku enzîmek nû nûve bike, ev yek gavên operasyonê hinekî tevlihev dike û dijwar e ku bi tevahî bixweber were zêdekirin.Piştî ku zanyaran di sala 1988-an de bi xeletî Taq DNA polymerase ji Thermus aquaticus veqetandin, ev pirsgirêk hate çareser kirin.Vedîtina vê enzîmê jî dikePCRteknolojî teknolojiyek hêsan, pratîk û gerdûnî ye.Heya nuha, Taq DNA polymerase di kîtên DNA de polîmeraza herî gelemperî ye.

2. PfuDNA

Wekî ku li jor hatî behs kirin, Taq DNase xwedan xeletiyek mezin e, ji ber vê yekê zanyaran Taq DNA polymerase heya radeyekê guhezandine da ku ji ber tevlihevbûnê ji zêdekirina ne-taybet dûr nekevin, û di encamê de encamên testê yên nerast çêdibin.Lê guherandina Taq DNA polymerase dikare çalakiya DNA polymerase li germahiya odeyê asteng bike.PfuDNA polymerase dikare kêmasiyên jorîn ên Taq DNA polymerase baş çêbike, da ku reaksiyona PCR bi normalî were meşandin, û rêjeya serkeftinê ya zêdekirina genê armanc dikare bi bandor were baştir kirin.

3. Reverse Transcriptase

Transkriptaza berevajî di sala 1970 de hat keşif kirin. Ev enzîm RNA-yê wekî şablonek, dNTP-ê wekî substrat bikar tîne, prensîba berhevkirina bazê dişopîne, û yek zencîreya ADN-ê ya temamkerê şablonê ARN-ê di riya 5'-3' de sentez dike.Transkriptaza berevajî di serî de bi çalakiya DNA polymerase ya ji şablonên DNA an RNA ve girêdayî ye û ji ber vê yekê çalakiya 3'-5' exonuclease tune.Lêbelê, ew xwedan çalakiya RNase H e, ku dirêjahiya senteza transkriptaza berevajî heya radeyekê sînordar dike.Ji ber pêbaweriya kêm û germbûna transkrîptaza berevajî ya hov, zanyaran jî ew guherandin.

BoPCRazmûnan, malzemeyên sereke ev in: boriyek PCR-ya ferdî, lûleya PCR-ya 4/8-xalî, lewheyên PCR.

Labio'sVexwarinên PCRjêrîn heneavantajên:

Plateyên PCR: Lihevhatina berferehiya gerîdeya germî;Nasnameya baş-berevajî, hêsan;baş fluorescence refleks;başveguhestina germê;DNase, RNase, DNA, astengkerên PCR pejirandî, û bêpîrojen hatine ceribandin.

lûleyên PCR yên takekesî: Berxwedêra evaporasyonê; başveguhestina germê;Zelaliya optîkî ya hêja; DNase, RNase, DNA, astengkerên PCR-ya pejirandî, û bêpîrojen hatine ceribandin.

4/8-strips tubes PCR: Dîwarên pir tenik; zelaliya bilind; refleksa floransê ya baş;dikare di pîşesaziya derman, pîşesaziya xwarinê, û biyolojiya molekulî de bikar bîne; materyalê PP-ya bi kalîte û bakîre; DNase pejirandî, RNase, DNA, astengkerên PCR, û bêpîrojen ceribandin.